Что показывает серологический анализ крови

Что показывает серологический анализ крови

Серологический анализ крови: что это такое, показания, расшифровка

Серологическое исследование крови – новейший метод клиническо-лабораторной диагностики, который совершенствуется и дополняется с каждым годом. Расшифровка цито-анализов может быть готова в течение нескольких часов с момента забора крови. Результат анализов максимально точно выявит возбудителя болезни; те антитела, которые способны противостоять инфекции. Также серологическое тестирование определяет группу крови человека, сложные гормональные отклонения.

Что такое серология

Серология – это наука о физико-химических, биологических свойствах сыворотки крови. Сыворотка – плазма крови, лишенная бесцветного белка фибриногена. В академической медицине под серологией понимают в узком смысле раздел иммунологии, изучающий взаимодействие антител крови с антигенами. Основная задача серологии – приготовление специфических лечебных сывороток, которые вводят человеку и животным при обнаружении пандемического заболевания. Проверка на ВИЧ, сифилис, туляремию, краснуху возможна благодаря этому исследованию.

Самое раннее открытие и применение серологических постулатов – учение о группах, переливании крови. Научные знания о локусах и аллелях А, В и 0, дали возможность проводить гемотрансфузию по правилам совместимости доноров и реципиентов.

Читайте также

Что показывает серология

Серологические анализы распространены в педиатрии, иммунологии и эпидемиологии. Широко применяют такие исследования на выявление инфекций, передающихся половым путем. Анализ назначают при исследовании:

  • краснухи;
  • кори;
  • паротита;
  • туляремии;
  • туберкулеза;
  • брюшного тифа;
  • ветряной оспы;
  • скарлатины;
  • коклюша;
  • сифилиса;
  • хламидиоза;
  • уреаплазмоза;
  • простого герпеса;
  • вируса иммунодефицита человека;
  • токсоплазмоза;
  • вирусных гепатитов;
  • Эпштейн-Барр (мононуклеоз);
  • хеликобактер;
  • лямблии;
  • клещевого энцефалита;
  • парвовируса;
  • боррелиоза;
  • микоплазмоза;
  • бруцеллеза.

Также исследования назначают для проверки эффективности назначенного лечения. Путем диагностики сыворотки, определяют количество, активность вируса. Профилактическое рассмотрение иммуноглобулина класса IgG позволяет оценить иммунную защиту организма, реакцию гуморального ответа, готовность противостоять заражению. Такой вариант назначают перед прививкой от гепатита В.

Показания

Серологические исследования (СИ) человека проводятся еще при внутриутробном развитии, когда проверяют резус-совместимость плода, матери. Во время беременности женщина сдает ряд СИ на ИППП; те болезни, которые могут передаться эмбриону. Основными показаниями к СИ считают:

  1. Вирусные, бактериологические, инвазионные болезни.
  2. Этап течения, степень тяжести заболевания.
  3. Эффективность лечения.
  4. Гормональные нарушения.
  5. Бесплодие неясной этиологии.
  6. Аутоиммунные заболевания.
  7. Аллергии.
  8. Ревматоидный артрит под вопросом.
  9. Скрининг беременных и готовящихся к зачатию (обследование мужчин).
  10. Иммунно-реактивная готовность организма.
  11. Определение группы крови и резуса.

Сдавать СИ можно в любой государственной или частной медицинской клинике. Предпочтение нужно отдать той лаборатории, которая имеет новейшее оборудование, врачей клин-лаб диагностики, а не фельдшеров, выполняющих расшифровку.

При самообращении в медицинское учреждение, пациентам предлагают два вида серологического теста – обычный и экспресс-метод. В таком случае можно выбрать стандартное исследование, так как знаниями о необходимости ускоренного варианта обладают только врачи. В некоторых случаях быстрый метод малоинформативен.

Исследование сыворотки в обязательном порядке назначают потенциальным донорам крови при обращении в центр переливания. Микрореакция на сифилис проводится очень быстро, в течение 2-3 минут; другие тесты делают чуть дольше 15-20 минут.

Подготовка к анализу

По скольку спектр серодиагностики инфекционных заболеваний очень разнообразен, на каждый случай составляют индивидуальный план подготовки. Основные принципы, которые применимы к приготовлению перед медицинскими манипуляциями:

  • не есть за 10-14 часов до сдачи анализа;
  • за 1-2 дня исключить прием жирной пищи и алкоголя;
  • не принимать медицинские препараты (витамины в том числе);
  • избегать стрессовых ситуаций и переживаний;
  • не курить за 3 суток до сдачи крови;
  • сдавать анализ утром на тощак;
  • проводить любые другие манипуляции, вмешательства после СИ.

Если нельзя отменить прием лекарств, например, пероральных контрацептивов, статинов, инсулина, то нужно предоставить врачу и лаборанту полный список принимаемых средств.

Методы проведения СИ

Серологические анализы подразделяются на количественные и качественные. Качественные дают однозначный ответ о наличии или отсутствии в организме антител (Ат), антигенов (Аг). Количественные результаты отображаются в виде чисел со знаками + в количестве от 1 до 4. Самые распространенные в современной медицине методы СИ:

  1. Агглютинация. Основана на принципе связывания Ат, Аг; что дает выпадение хлопьеобразного осадка в сыворотке.
  2. Гемагглютинация. Применяются адсорбированные эритроциты.
  3. Преципитация. Образование помутнения от связки Аг с Ат.
  4. Коагглютинация. Выявление негативных антигенов при сывороточном введение антител, широко распространена адсорбция на белке стафилококка.
  5. Подавление гемагглютинации. Подавление соединительной функции Аг со свободными эритроцитами.
  6. Непрямая реакция Кумбса. Определение антител к антигенам эритроцитов.
  7. Кольцепреципитация. Наслоение антигенов на лечебную сыворотку.
  8. Двойная радиальная иммунодиффузия. Проникновение антигенов в лунки агар-агар питательной среды, растворенной в сыворотке
  9. Реакция связывания комплемента. Индикатор – эритроциты барана в гемолитической сыворотке, который сигнализирует о смешивании предполагаемых Аг и Ат иммунитета.
  10. Нейтрализация вирусов родными антителами.
  11. Маркирование Ат и Аг флуоресцентным или ферментным составом. Иммунофлюоресцентный РИФ, иммуноферментный ИФА методы.

В сложных случаях – неясной клинической картине, высокой пандемичности и молниеносном распространении инфекции, специалистами лаборатории может быть принято решение о проверке одного показателя несколькими разными методами.

Серологический анализ крови является инструментом подтверждения или опровержения диагноза, но никак не способом первичной постановки.

Норма референтных показателей для каждого из методов подбирается индивидуально, зависит от пола, возраста, физиологического состояния больного. обследуемой болезни.

Иммунофлюоресцентный и иммуноферментный методы

Антитела, помеченные светящимся раствором, вводятся в сыворотку. В качестве меток чаще всего применяют флуороционат, который придает клеткам зеленое свечение под ультрафиолетовой лампой. Результат анализа качественный, базируется на яркости свечения. РИФ проводят прямым, непрямым методами, при котором сначала вводят обычные АТ, а затем маркированные для избежания неспецифической реакции цепи.

Метод ИФА основан на выявлении антител, антигенов путем маркирования ферментом какой-либо клетки. В результате химических реакций образуются окрашивания сыворотки в зависимости от того, есть ли злокачественные Аг и какие именно. В свою очередь, ИФА подразделяется на гомогенный и гетерогенны способ. Гомогенно исследуют в жидком растворе, а гетерогенно на твердой основе.

Расшифровка

В расшифровке на первом месте стоит приставка Anti, после которой следуют буквы T или G, что указывает на антитела или антигены. Ранние и поздние тела возбудителя болезни указываются как M и G соответсвенно. Например, анализ на гепатит на ранние антитела выглядет как Аnti-НАV IgМ, поздние Аnti-НАV IgG. Цифры со знаками + указывают на количество обнаруженых тел. Например, Аnti-НАV IgМ +11 и Аnti-НАV IgG +++ 1000 означает, что человек переболел гепатитом ранее, на данный момент воспалительного процесса в организме нет. HВsAg антиген, показывающий наличие заболевания. Аnti-НВе – признак вялотекущей формы гепатита.

Читайте также:  Ирифрин БК капли глазные - инструкция, цена, отзывы

По группам крови иная расшифровка – А, В и 0. 0 (+) – первая положительная группа крови, 0 (-) первая отрицательная. А0 и АА втораяя группа, ВВ и В0 третья, АВ четвертая. Знак + положительный резус, – отрицательный. При исследовании крови матери и эмбриона, результаты матери пишут первыми, через дробную черту плода. Если обнаружен резус конфликт, то в конце ставят три восклицательных знака.

Преимущества серологии

Высокая чувствительность к возбудителям инфекции сделали серологические анализы самыми востребованными по всей планете. Обширный перечень определяемых антигенов пополняется с каждым годом, что совершенствует серологию, обновляет ее поисковый список. Быстрая исполнительность анализов – от 2 минут, позволяет максимально рано определить причину болезни. Для постановки диагноза достаточна маленькая доза крови – до 10 мл. Возможность мониторинга течения заболевания делают СИ способом дополнительного обследования во время лечения.

Минусов серологические исследования практически не имеют. На данный момент перечень исследований ограничен базой антител и антигенов, которые открыты наукой и изучены. Новые вспышки вирусных болезней пополняют объекты наблюдения эпидемиологов, инфекционистов, поэтому появление очередного вида вируса только способствует развитию серологии.

Существенная сложность, отличающая серологические анализы, это высокие требования к лаборантам и врачам-вирусологам. От исполнителя анализа требуется внимательность и точность при совершении реакций и подсчете результатов. А ученые должны точно описать и исследовать свойства и характерные особенности изучаемых объектов, на основании которых построить алгоритм для младшего медицинского персонала.

Читайте также

Серологические исследования – это новейший метод изучения сыворотки крови, направленный на выявление специфичных антител и антигенов. СИ рассматривают широкий перечень исследуемых возбудителей, передающихся воздушно-капельным, урогенитальным, гематологическим путем. Серологические анализы могут быть выполнены в кратчайшие сроки и представить в расшифровке не только идентифицированного возбудителя, но и наиболее эффективное лечение. СИ также позволяют наблюдать за течением заболевания и определять его тяжесть. Серология широко используется для определения группы крови, резус-фактора, гормональных сбоев, аллергий.

Иммуноферментные исследования

Методика иммуноферментного анализа применяется в различных отраслях медицины. Но в большинстве случаев данным методом диагностируют широкий круг инфекционных заболеваний, таких как вирус иммунодефицита человека, гепатит, герпес и прочих инфекций половых органов. Также иммуноферментный анализ применяют для выявления онкомаркеров различного происхождения, определения гормонов и при диагностике репродуктивной функции организма. Материалом для иммуноферментного исследования является кровь человека.

Иммуноферментный анализ крови – это лабораторное иммунологическое исследование, при котором происходят качественные и количественные измерения антител (антигенов), а также гормонов. Этот метод предоставляет до 90% точности при установлении диагноза заболевания.

Медицинские лаборатории используют несколько вариантов его проведения, что влияет на срок готовности результатов. Но в среднем выдача результатов исследования происходит в период 1-10 дней после сдачи крови.

Иммуноферментный анализ крови и расшифровка его результатов

При данном виде анализа крови устанавливаются антитела разных видов – это иммуноглобулины класса M, A, G (JgM, JgA, JgG). Их накопление происходит в различные временные промежутки.

Вторыми проявляются иммуноглобулины класса G (через три-четыре недели). Они задерживаются в организме несколько месяцев или лет. Во время проведения иммуноферментного анализа крови и расшифровки его результата можно обнаружить возрастание антител класса G. Это свидетельствует о наличии инфекции или реинфекции.

Антитела класса А проявляются в крови на протяжении двух-четырех недель. Но всего лишь 20% из них присутствуют в сыворотке крови. Остальные же входят в состав секрета слизистых оболочек.

Иммуноглобулины класса А начинают исчезать в промежутке времени от двух недель до двух месяцев.
Данный процесс является свидетельством уничтожения инфекции в организме.
Если после выздоровления человека проводился повторный иммуноферментный анализ
крови и расшифровка результата показала наличие антител класса А – это свидетельство хронической инфекции.

При иммуноферментном анализе крови расшифровка результатов может принимать такие значения:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) – отсутствие иммунитета к инфекции
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) – наличие поствакционного или постинфекционного иммунитета
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) – наличие острой инфекции
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) – наличие обострения хронической инфекции
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) – наличие хронической инфекции
  • JgM (-) – выздоровление

Следует помнить, при иммуноферментном анализе крови в расшифровке (+) является положительным результатом, а (–) – отрицательным результатом. Помимо уточнения классов антител при иммуноферментном анализе крови в расшифровке встречаются количественные их показатели. Но обширное их объяснение может предоставить только лечащий врач.

Результат иммуноферментного анализа крови в норме

Иммуноферментный анализ сыворотки крови исследует практически все гормоны щитовидной железы, онкомаркеры и различные виды инфекций.

К гормонам щитовидной железы относятся тиреоглобулин (ТГ), тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3), свободный тироксин (Т4), свободный трийодтиронин (Т3).

Иммуноферментный анализ крови в норме считается, если присущи такие допустимые нормы гормонов щитовидной железы:

  1. тиреоглобулин (ТГ) – допустимые границы 70 МЕ/мл
  2. тироксин (Т4) – 64-146 нмоль/л (50-113 нг/мл)
  3. трийодтиронин (Т3) – 1,8-2,8 нмоль/л (0,8-2,0 нг/мл)
  4. свободный тироксин (Т4) – 11-25 пмоль/л (10-27 пг/мл)
  5. свободный трийодтиронин (Т3) – 4,49-9,3 пмоль/л (2,5-5,8 пг/мл)

В случае исследования половых гормонов иммуноферментный анализ крови в норме для женщин считается, если в организме выделяется лютеинизирующий гормон (ЛГ) в таких пределах:

  • фолликулярная фаза цикла (с первого дня месячных до двенадцатого-четырнадцатого) – 2-14 мЕд/л;
  • овуляционная фаза цикла (с двенадцатого дня по четырнадцатый день) – 24-150 мЕд/л;
  • лютеиновая фаза цикла (с пятнадцатого-шестнадцатого дня и до начала следующих месячных) – 2-17 мЕд/л.

Иммуноферментный анализ крови в норме для мужчин принимается, если половой гормон вырабатывается в пределах 0,5-10 мЕд/л. При исследовании хронического гонадотропина (ХГ) референсные значения зависят от пола человека. У взрослых мужчин и небеременных женщин прииммуноферментноманализекровинормой считается уровень ХГ ниже 5мЕд/мл. У беременных женщин результат зависит от срока беременности и может колебаться в пределах 25-49000 мЕд/мл.

В нашем центре можно сдать следующие виды анализов для иммуноферментных исследований:

Диагностика инфекционных заболеваний

Диагностика инфекционных заболеваний является одной из самых сложных проблем в клинической медицине. Лабораторные методы исследования при ряде нозологических форм играют ведущую, а в целом ряде клинических ситуаций решающую роль не только в диагностике, но и в определении конечного исхода заболевания.

Читайте также:  Симптомы низкого уровня тестостерона и как с ним бороться - GymBeam Blog

Диагностика инфекционных заболеваний почти всегда предусматривает использование комплекса лабораторных методов.

Сеть независимых лабораторий «Ситилаб» в своей работе для диагностики инфекционных заболеваний использует 3 группы специальных лабораторных методов исследования:

  1. бактериологические;
  2. серологические;
  3. метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для обнаружения ДНК или РНК возбудителя инфекционного заболевания в исследуемом материале.

У одних пациентов для диагностики этиологии инфекционно-воспалительного процесса достаточно провести бактериологическое исследование, в других клинических ситуациях решающее значение имеют данные серологических исследований, в третьих, предоставить полезную информацию может только метод ПЦР. Однако наиболее часто в клинической практике врачу-клиницисту необходимо использовать данные различных методов лабораторных исследований.

Бактериологические методы исследования

Бактериологические исследования наиболее часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания (составляют 40-60% в структуре хирургических заболеваний) с целью их диагностики, изучения этиологической структуры, определения чувствительности возбудителей к антибактериальным препаратам. Результаты бактериологических анализов способствуют выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций.

Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний являются истинно-патогенные бактерии, но наиболее часто условно-патогенные микроорганизмы, входящие в состав естественной микрофлоры человека или попадающие в организм извне. Истинно-патогенные бактерии в большинстве случаев способствуют развитию инфекционного заболевания у любого здорового человека. Условно-патогенные микроорганизмы вызывают заболевания преимущественно у людей с нарушенным иммунитетом.

Бактериологические исследования при заболеваниях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, направлены на выделение всех микроорганизмов, находящихся в патологическом материале, что существенно отличает их от аналогичных исследований при заболеваниях, вызванных истинно патогенными микроорганизмами, когда проводится поиск определенного возбудителя.

Для получения адекватных результатов бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях особенно важно соблюдать ряд требований при взятии биоматериала для анализа, его транспортировки в лабораторию, проведения исследования и оценки его результатов.

Для идентификации вида возбудителя гнойно-воспалительных заболеваний и определения чувствительности к антибактериальным препаратам бактериологические лаборатории используют комплекс методов. Они включают:

  • микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия) из доставленного биоматериала;
  • выращивание культуры микроорганизмов (культивирование);
  • идентификацию бактерий;
  • определение чувствительности к антимикробным препаратам и оценку результатов исследования.

Доставленный в бактериологическую лабораторию биоматериал первоначально подвергается микроскопическому исследованию.

Микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия), окрашенного по Граму или другими красителями, проводят при исследовании мокроты, гноя, отделяемого из ран, слизистых оболочек (мазок из цервикального канала, зева, носа, глаза и т.д.). Результаты микроскопии позволяют ориентировочно судить о характере микрофлоры, ее количественном содержании и соотношении различных видом микроорганизмов в биологическом материале, а также дает предварительную информации об обнаружении этиологически значимого инфекционного агента в данном биоматериале, что позволяет врачу сразу начать лечение (эмпирическое). Иногда микроскопия позволяет выявить микроорганизмы, плохо растущие на питательных средах. На основании данных микроскопии проводят выбор питательных сред для выращивания микробов, обнаруженных в мазке.

Культивирование микроорганизмов. Посев исследуемого биоматериала на питательные среды производят с целью выделения чистых культур микроорганизмов, установления их вида и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Для этих целей используют различные питательные среды, позволяющие выделить наибольшее количество видов микроорганизмов. Оптимальными являются питательные среды, содержащие кровь животного или человека, а также сахарный бульон, среды для анаэробов. Одновременно производят посев на дифференциально-диагностические и селективные (предназначенные для определенного вида микроорганизмов) среды. Посев осуществляют на стерильные чашки Петри, в которые предварительно заливают питательную среду для роста микроорганизмов.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму

1 — стрептококки; 2 — стафилококки; 3 — диплобактерии Фридленда; 4 — пневмококки

Чашки Петри с посевами инкубируют в термостате при определенных температурных, а для ряда микроорганизмов газовых (например, для выращивания анаэробов создают условия с низким содержанием кислорода) режимах в течение 18-24 ч. Затем чашки Петри просматривают. Количественную обсемененность доставленного биоматериала микрофлорой определяют по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл или 1 мг исследуемого образца. При просмотре чашек Петри выявляют некоторые особенности изменения цвета среды, ее просветления в процессе роста культуры. Многие группы бактерий образуют характерные формы колоний, выделяют пигменты, которые окрашивают колонии или среду вокруг них. Из каждой колонии делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Оценивают однородность бактерий, форму и размер, наличие спор или других включений, капсулы, расположение бактерий, отношение к окраске по Граму. Вся эта информация служит важнейшей составляющей для выбора сред и получения в дальнейшем чистой культуры каждого микроорганизма.

Колонии отсевают на плотные, жидкие, полужидкие питательные среды, оптимальные для культивирования определенного вида бактерий.

Выделенные чистые культуры микроорганизмов подвергают дальнейшему изучению в диагностических тестах, основанных на морфологических, ферментативных, биологических свойствах и антигенных особенностях, характеризующих бактерий соответствующего вида или варианта.

Идентификация — это комплекс бактериологических методов изучения бактерий, позволяющий определить вид микроорганизма. В Лаборатории «Ситилаб» идентификация большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства. На бланке результата исследования в виде наименования микроорганизма или его рода, например, Streptococcus pneumoniae (пневмококк) или Eschrichia coli (кишечная палочка).

Определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антимикробным препаратам изучают у выделенных чистых культур микроорганизмов имеющих этиологическое значение для данного заболевания. Поэтому в направлении на бактериологические анализы требуется указать диагноз заболевания у больного. Определение чувствительности бактерий к спектру антибиотиков помогает лечащему врачу правильно выбрать препарат для лечения больного.

В Лаборатории «Ситилаб» определение чувствительности выделенной чистой культуры большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства к широкому спектру современных антибактериальных препаратов (от 6 до 32 препаратов, в зависимости от выделенного микроорганизма) с определением минимальной ингибирующей концентрации (МИК). На бланке результатов определения чувствительности к антибактериальным препаратам обозначение R — указывает на резистентность, I — умеренную чувствительность, S — чувствительность микроорганизма к данному препарату.

Оценка результатов исследования. Принадлежность условно-патогенных микроорганизмов к естественной микрофлоре организма человека создает ряд трудностей при оценке их этиологической роли в развитии гнойно-воспалительных заболеваний. Условно-патогенные микроорганизмы могут представлять нормальную микрофлору исследуемых жидкостей и тканей или контаминировать их из окружающей среды. Поэтому для правильной оценки результатов бактериологических исследований необходимо знать состав естественной микрофлоры изучаемого образца. В тех случаях, когда исследуемый биоматериал в норме стерилен, как, например, спинномозговая жидкость, экссудаты, все выделенные из него микроорганизмы могут считаться возбудителями заболевания. В тех случаях, когда исследуемый материал имеет собственную микрофлору, как, например, отделяемое влагалища, кал, мокрота, нужно учитывать изменения ее качественного и количественного состава, появление несвойственных ему видов бактерий, количественную обсемененность биоматериала. Так, например, при бактериологическом исследовании мочи степень бактериурии (число бактерий в 1 мл мочи), равная и выше 10 5 , свидетельствует об инфекции мочевых путей. Более низкая степень бактериурии встречается у здоровых людей и является следствием загрязнения мочи естественной микрофлорой мочевых путей.

Читайте также:  Мирамистин — подборка материалов

Установить этиологическую роль условно-патогенной микрофлоры помогают также нарастание количества и повторность выделения бактерий одного вида от больного в процессе заболевания.

Врач-клиницист должен знать, что положительный результат бактериологического исследования в отношении биологического материала, полученного из в норме стерильного очага (кровь, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость, пунктат органа или ткани), всегда тревожный результат, требующий немедленных действий по оказанию медицинской помощи.

Серологические методы исследования

В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Серологические реакции используются в двух направлениях.

1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является сыворотка крови, так как постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты получают при исследовании «парных» сывороток крови больного, взятой в начале заболевания (3-7-й день) и через 10-12 дней. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител. При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и большее повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение.

С внедрением в практику лабораторий метода иммуноферментного анализа (ИФА) стало возможным определять в крови больных антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (IgM и IgG), что существенным образом повысило информативность серологических методов диагностики. При первичном иммунном ответе, когда иммунная система человека взаимодействует с инфекционным агентов в первый раз, синтезируются преимущественно антитела, относящиеся к иммуноглобулинам класса М. Лишь позднее, на 8-12 день после попадания антигена в организм, в крови начинают накапливаться антитела иммуноглобулинов класса G. При иммунном ответе на инфекционные агенты вырабатываются также и антитела класса А (IgA), которые играют важную роль в защите от инфекционных агентов кожи и слизистых оболочек.

2. Установление родовой и видовой принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками.

Серологические исследования не обладают 100 % чувствительностью и специфич-ностью в отношении диагностики инфекционных заболеваний, могут давать перекрестные реакции с антителами, направленными к антигенам других возбудителей. В связи с этим оценивать результаты серологических исследований необходимо с большой осторожностью и учетом клинической картины заболевания. Именно этим обусловлено использование для диагностики одной инфекции множества тестов, а также применение метода Western-blot для подтверждения результатов скрининговых методов.

В последние годы прогресс в области серологических исследований связан с разработкой тест-систем для определения авидности специфических антител к возбудителям различных инфекционных заболеваний.

Авидность — характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами. В ходе иммунного ответа организма на проникновение инфекционного агента стимулированный клон лимфоцитов начинает вырабатывать сначала специфические IgM-антитела, а несколько позже и специфические IgG-антитела. IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью, то есть достаточно слабо связывают антиген. Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоспецифичных (высокоавидных) IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами. На основании этих закономерностей иммунного ответа организма в настоящее время разработаны тест-системы для определения авидности специфических IgG-антител при различных инфекционных заболеваниях. Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование и тем самым с помощью серологических методов установить период инфицирования пациента. В клинической практике наиболее широкое распространение нашло определение авидности антител класса IgG при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции, что дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на эти инфекции, в особенности при беременности или планировании беременности.

Метод полимеразной цепной реакции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать. Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, то есть одной бактерии или вирусной частицы. Введение в реакцию дополнительного этапа — синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы — позволило тестировать РНК-вирусы, например, вирус гепатита С. ПЦР — это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК идентифицируют методом иммуноферментного анализа или электрофореза.

В ПЦР может быть использован различный биологический материал — сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д. В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких как вирусные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, передающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфекции), туберкулез, ВИЧ-инфекция и т.д.

Преимущество ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими методами исследований заключается в следующем:

  • возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организма, в т.ч. и материале, получаемом при биопсии;
  • возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболевания;
  • возможность количественной оценки результатов исследований (сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале);
  • высокая чувствительность метода; например чувствительность ПЦР для выявления ДНК вируса гепатита В в крови составляет 0,001 пг/мл (приблизительно 4,0 . 10 2 копий/мл), в то время как метода гибридизации ДНК с использованием разветвленных зондов — 2,1 пг/мл (приблизительно 7,0 . 10 5 копий/мл).
Ссылка на основную публикацию
Что показывает МРТ головного мозга онкологический центр; Sofia
Какие болезни может выявить МРТ Такой метод, как магнитно-резонансная томография уже давно получил широкое применение в медицине. Благодаря тому, что...
Что можно беременным от кашля
Кашель при беременности: чем лечить Кашель при беременности — это не такое безобидное состояние, как считают многие люди. Часто он...
Что можно делать после удаления зуба, а что нельзя
Рекомендации после удаления зуба После удаления зуба в пустой лунке образуется сгусток крови. Полноценный сгусток крови – залог быстрого, безболезненного...
Что показывает общий анализ мочи
Общий анализ мочи – что показывает у взрослых? При подозрении на любые болезни мочеполовой системы обязательно проводится общий анализ мочи...
Adblock detector